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二维超高效液相色谱-串联质谱法测定尿液中8-羟基脱氧鸟苷
          
Two-Dimensional UHPLC-MS/MS Determination of 8-Hydroxydeoxyguanosine in Urine

摘    要
尿液样品离心后经WATERS C18固相萃取柱净化,收集洗脱液。采用二维超高效液相色谱-串联质谱法测定样品溶液中8-羟基脱氧鸟苷的含量。以Waters BEH C18色谱柱(一维色谱)和Waters BEH HILIC色谱柱(二维色谱)为固定相,以0.1%(体积分数,下同)甲酸溶液与乙腈(体积比8:2)组成的混合液(一维色谱)和0.1%甲酸溶液与乙腈(体积比9:1)组成的混合液(二维色谱)为流动相,串联质谱分析中采用电喷雾离子源正离子模式和多反应监测模式。采用内标法定量。8-羟基脱氧鸟苷的线性范围为0.25~300.0 ng·g-1,检出限(3S/N)为0.10 ng·g-1。以空白样品为基体进行加标回收试验,所得回收率为96.6%~103%,测定值的日内相对标准偏差(n=6)和日间相对标准偏差(n=4)依次为0.87%~3.3%,1.9%~4.9%。
标    签 二维超高效液相色谱-串联质谱法   8-羟基脱氧鸟苷   尿液   two-dimensional UHPLC-MS/MS   8-hydroxydeoxyguanosine   urine  
 
Abstract
After centrifugation, the urine sample was purified with WATERS C18 solid phase extraction column, and then the eluate was collected. Two-dimensional UHPLC-MS/MS was applied to the determination of 8-hydroxydeoxyguanosine in the sample solution. Waters BEH C18 chromatographic column (for one-dimensional chromatography) and Waters BEH HILIC chromatographic column (for two-dimensional chromatography) were used as stationary phase. The mixture of 0.1% (φ, the same below) formic acid solution and acetonitrile with volume ratio of 8∶2 (for one-dimensional chromatography) and the mixture of 0.1% formic acid solution and acetonitrile with volume ratio of 9∶1 (for two-dimensional chromatography) were used as mobile phase. ESI+ and multi-reactions monitor mode were adopted in MS/MS. Internal standard method was used for quantitative. Linearity range of 8-hydroxydeoxyguanosine was found in the range of 0.25-300.0 ng·g-1 with detection limit (3S/N) of 0.10 ng·g-1. On the matrix of blank sample, test for recovery was made by standard addition method; values of recovery found were in the range of 96.6%-103%, with intra-day RSDs (n=6) and inter-day RSDs (n=4) of determined values in the ranges of 0.87%-3.3% and 1.9%-4.9% respectively.

中图分类号 O657.63   DOI 10.11973/lhjy-hx202012009

 
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收稿日期 2019/12/10

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备注石振宁,硕士研究生,研究方向为药剂学

引用该论文: SHI Zhenning,JIN Youxun,SONG Dewei,ZHANG Jing,XU Bei,LI Hongmei,SHI Lianhua. Two-Dimensional UHPLC-MS/MS Determination of 8-Hydroxydeoxyguanosine in Urine[J]. Physical Testing and Chemical Analysis part B:Chemical Analysis, 2020, 56(12): 1294~1298
石振宁,金有训,宋德伟,张睛,徐蓓,李红梅,石莲花. 二维超高效液相色谱-串联质谱法测定尿液中8-羟基脱氧鸟苷[J]. 理化检验-化学分册, 2020, 56(12): 1294~1298


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参考文献
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