当前，中成药、保健食品和宣称具有治疗功能的食品等保健品中，非法添加化学药物的行为屡禁不止，严重危害公众健康。发现健康产品中新的非法添加成分和建立通用检测方法是食品药品监督检验的一项重要工作。
 
在食品药品非法添加的监督检验工作中，需要对海量样品中可能添加的多种化学成分进行快速分析，这使得检测机构面临巨大的样品测试压力，迫切需要高通量快速检测方法。
 
国家食品药品监督管理局批准的补充检验方法2009030中采用高效液相色谱法（HPLC）和液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）同时测定壮阳类中成药和保健食品中西地那非、豪莫西地那非、羟基豪莫西地那非、那莫西地那非、硫代艾地那非、红地那非、那红地那非、伐地那非、伪伐地那非、他达拉非和氨基他达拉非等11种化合物。
   
目前，HPLC是目前国内外药物定性及定量分析的主要手段，提高HPLC的使用率将大大提高监督检验效率。HPLC常规分析一般采用粒径5μm填料的色谱柱。根据色谱速率理论，粒径越小柱效越高，减小粒径是提高分离效率和分离速度的一种有效手段。新型色谱填料及装填技术的发展日新月异，粒径小于5μm的亚微米填料开始被广泛应用并已商品化。当粒径小到亚2μm左右时，随着线速率的提高，分离度不再降低。粒径减小带来了柱压的急剧升高，对色谱系统耐压性能要求很高，需要寻求粒径与压力的平衡点。
 
Fused-Core（核壳或熔融）技术将多孔硅壳熔融到实心硅核上制备色谱柱，减少了扩散质路径和峰宽，允许使用更短的色谱柱和较高的流量以达到快速高分辨率分离。尤其是亚3μm（2～3μm）填料产生的柱压明显低于亚2μm色谱柱，能应用于常规HPLC仪器，同时获得比传统填料显著提升的柱效。
   
广东省食品药品检验所和广东药学院的研究者们选择检验方法2009030的11种化学成分和国内文献新报道添加的7种成分（阿扑吗啡、酚妥拉明、育亨宾、艾地那非、羟基硫代豪莫西地那非、硫代西地那非和硫代豪莫西地那非）作为研究对象，采用亚3μm填料色谱柱建立了壮阳类健康产品非法添加18种化学成分的高效液相色谱快速检测方法。样品经乙腈（1+1）溶液超声提取后，提取液经以亚3μm填料的Agilent Poroshell 120 EC-C18色谱柱 (50mm×4.6mm, 2.7μm)分离，以磷酸三乙胺缓冲溶液（pH5.7）-甲醇-乙腈（70+15+15）混合液为流动相A、甲醇-乙腈（1+1）混合液为流动相B进行梯度洗脱，采用二极管阵列检测器，检测波长为230nm。
 
18种添加物的检出限（3S/N）均为为1.0 mg/kg，测定下限（10S/N）均为3.0 mg/kg。8种代表性添加物的线性范围为5.0～500 mg/L，加标回收率在88.2%～103%之间，测定值的相对标准偏差(n=6)在0.4%～1.6%之间。
 
通过测试从市场收集的500批样品，发现了多种国家标准未涵盖的新的非法添加成分。
 
与常规HPLC法相比，该方法的分析时间显著减少，检验效率大大提高，取得了良好的效果，可为建立新国家标准方法提供参考。


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节选自《理化检验-化学分册》2016年第52卷第3期
 
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本文作者：雷毅，广东省食品药品检验所主任药师，主要从事食品药品检测工作。